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技術支持

你知道如何使用貝克曼DNA純化試劑盒從動物組織中提取基因組DNA嗎?
發布時間:2022-01-19   點擊次數:90次
   貝克曼DNA純化試劑盒是根據氯化芐法構建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化,從而破壞細胞壁的特性。本制品利用了這一特性,將植物樣品凍結融解后,再使用PipetTip的將植物樣品在Microtube壁上數次按壓即可破壞細胞壁。本法與傳統方法相比,省去了液氮研磨等煩瑣步驟,有利于一次性處理大量樣品。而且,本制品經過了改良,熱處理時間只需15分鐘,使用本制品從實驗開始至水相回收只需30分鐘時間。得到的基因組DNA可以進行PCR擴增及限制酶處理等。
  全套操作約需1小時,分勻漿、細胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟,詳細說明如下。
  勻漿和細胞裂解:
  使用不同的實驗材料需采用不同的勻漿步驟,具體說明如下:
  使用研缽進行勻漿時:
 ?、偃?~100mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的研缽中,快速用力展研成勻漿。
  注)下列組織請加液氮研磨至粉末狀。
  A.富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。
  B.富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
  C.富含角質蛋白的組織或堅硬的組織(如骨骼)等。
 ?、诩尤?50μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1,溫和研磨30秒鐘。
  注)使用上述①-注)的實驗材料時,請在加入SolutionA及RNaseA1后,將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
 ?、凼占?50μl研磨好的組織勻漿液移至CollectionTube中。如果勻漿體積不足650μl,請補充SolutionA至650μl,65℃保溫5分鐘。
  使用研磨棒進行勻漿時:
 ?、偃?~100mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的CollectionTube中,用研磨棒快速研磨成糊狀。
 ?、诩尤?50μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
 ?、奂尤?50μl的SolutionA將研磨棒上的勻漿沖入CollectionTube中,充分振蕩混合后,65℃保溫5分鐘。

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